У багатьох фантастичних книгах і фільмах використовують сюжет заморожування людей - зупинив час, перечекав важкий період, відігрівся і продовжив життя далі. Неймовірно, але в багатьох клініках ЕКО кріоконсервація ембріонів - звичайна процедура. Як відбувається заморожування ембріонів у Клініці МАМА? Розповідає провідний ембріолог Клініки МАМА, старший науковий співробітник кафедри ембріології МГУ, кандидат біологічних наук Роман ШАФЕІ.

Зараз в клініках ЕКО використовується дві технології кріоконсервації. Технологія, називана "повільним заморожуванням", і вітрифікація.

У більшості клінік ЕКО, на жаль, все ще використовують "повільне заморожування". Цю процедуру здійснюють таким чином: ембріон переносять із пробірки з живильним розчином у середу з кріопротекторів, і витримують близько 10 хв.

кріопротекторів - це речовини, що захищають клітини від переморажіванія, освіти кристаликів льоду і пошкодження клітини. При повільному заморожуванні кріопротекторів служать пропіленгліколь і сахароза (попросту - тростинний цукор). Пропіленгліколь захищає клітини ембріона зсередини, а сахароза - зовні.

Ембріони з кріопротекторной середовищем засмоктують у пластикові соломинки ...

На зразок тих, що подають до коктейлів?

Так, лише покороче і тонший, і зроблені вони з нетоксичного пластику. Крім того, у кріосоломінок є "пробочка" для запечатування. На соломинці з ембріоном пишуть незмивним маркером прізвище пацієнтки, номер її карти, дату заморожування і порядковий номер соломинки. Так що переплутати їх при розморожуванні неможливо.

Далі соломинку з ембріоном починають повільно прохолоджувати. Охолоджувати соломинку потрібно дуже повільно, з постійною швидкістю - півградуса в хвилину. Для створення таких строгих умов використовують спеціальні апарати - "програмовані заморажівателі".

Коли температура знизиться до 7 градусів морозу, до соломинці доторкаються охолодженим у рідкому азоті пінцетом - і вміст соломинки замерзає. Кристалики необхідні, щоб викликати процес виморожування води з клітин ембріона - приблизно так, як на морозі висихає білизна. Далі продовжують повільно прохолоджувати соломинку до мінус 35 градусів, а потім швидким рухом переносять її в рідкий азот, в якому і зберігають остаточно при температурі 196 градусів морозу.

Чому метод повільного заморожування вважають застарілим, в чому його слабкі сторони?

Захист ембріонів від льоду в технології повільного заморожування побудована на виморожування води, що приводить до обезводнення клітин.

Виморожування води для ембріонів - "ціпок про два кінці ". З одного боку, зневоднення ембріонів допомагає їм пережити заморожування. Але з іншого боку, зневоднення саме по собі найчастіше виявляється згубним. Адже йдеться про дуже сильному зневодненні, при повільному заморожуванні клітка втрачає до 85-90% води. При таких втратах із клітки йде не тільки вся так звана "вільна вода", але частково і "зв'язана вода", що входить до складу білків. А це призводить до руйнування білкових молекул і, в кінцевому підсумку, до руйнування самої клітини.

Це небезпечно для ембріонів, не надто ефективно. Для здійснення цього методу необхідна дорога апаратура, невиправдано великі витрати тонкого ручної праці.

Які апарати для повільного заморожування вважаються кращими?

Про це не варто міркувати, щоб не вводити читачів в оману.

Сьогодні міркувати про кращих програмованих заморажівателях так само безглуздо, як міркувати про кращих друкарських машинках або гасових лампах. Серед них, безумовно, є кращі, але для сучасної медицини це не має ніякого значення.

Розкажіть про технології вітрифікація. Адже саме ця технологія заморожування ембріонів вважається сучасної.

При вітрифікація захист ембріонів заснована на іншому підході - отут не допускається утворення кристалів льоду взагалі. Вся рідина - як в кріосоломінке, так і в клітинах ембріона - при охолодженні до температури рідкого азоту переходить у склоподібний стан, не утворюючи кристали. Для цього використовують інші, більш складні кріопротекторние середовища, ніж при повільному заморожуванні. Ембріони знаходяться в кріопротекторной середовищі всього одну-дві хвилини, а потім набирають у кріосоломінку і занурюють у рідкий азот.

Метод вітрифікація набагато більш безпечний для ембріонів, ніж повільне заморожування. За найостаннішими даними, при вітрифікація гинуть і ушкоджуються не більше 10-12% ембріонів. Решта ембріони розморожуються без втрат. У той же час, при застосуванні повільного заморожування загибель ембріонів становить 25-65%.

Які клініки ЕКО в Росії використовують технологію вітрифікація?

Перша дитина, народжена в Росії в Клініці МАМА
після програми ЕКЗ з використанням вітрифікація ембріонів

У Росії всього кілька клінік застосовують вітрифікація для заморожування ембріонів. Але в більшості з них поки не отримані вагітності після переносу розморожених ембріонів, оскільки досвід у них невеликий - не більше року. Виняток становить Клініка Репродукції МАМА. Ми використовуємо вітрифікація ембріонів з 2002 року. Зараз, завдяки застосуванню вітрифікація в клініці МАМА, з'явилися на світ понад 40 дітей. Для Росії це унікальний досвід. І цим досвідом ми із задоволенням ділимося з іншими клініками - на Всеросійських конференціях і внутріклініческіх семінарах. У цьому році ще 7 російських клінік перейняли нашу технологію кріоконсервації ембріонів методом вітрифікація і вже активно використовують її в медичній практиці.

Як довго можуть зберігатися заморожені ембріони, і що являє собою кріо-сховищі?

Теоретично, якщо умови зберігання стабільні, то термін не обмежений. Але поки відомий випадок настання вагітності після переносу ембріонів, що зберігалися в рідкому азоті 12 років.

У загальних словах, криохранилище - це приміщення з судинами Дьюара - щось на зразок гігантської металевої термоса, заповненого рідким азотом. У ньому є спеціальні комірки, в яких знаходяться соломинки із замороженими ембріонами.

Для чого використовують заморожування ембріонів?

Перш за все, для того щоб зберегти надлишкові, але хороші ембріони, не використані в програмі ЕКЗ. У деяких клініках їх запросто називають "зайвими" ембріонами, але мені таке слово не подобається. Вони не зайві, вони саме надлишкові на даний момент. Адже в програмі ЕКЗ ми не переносимо пацієнтці більше двох ембріонів, а інші хороші ембріони заморожуємо. Якщо вагітність не настане, що залишилися ембріони можна розморозити і перенести пацієнтці в іншому циклі.

Роман Шафеі
Стаття отримана: www.ma-ma.ru

Детальніше »