Радимо почитати: Кріоконсервація сперми в програмі лікування безпліддя

Широке впровадження методики ICSI в клінічну ембріологію на початку 90-х років дозволило проводити запліднення сперматозоїдами пацієнтів з олігозооспермія (нечисленні сперматозоїди в еякуляті), а також сперматозоїдами , отриманими хірургічним шляхом у пацієнтів з азооспермія (сперматозоїдів в еякуляті немає). При цьому кількість придатних для запліднення рухомих нормальних сперматозоїдів може виявитися вкрай малим, а їх виділення дуже трудомістке і вимагає великих зусиль і витрат часу. Якщо існує високий ризик повторного неотримання цього унікального генетичного матеріалу або фізична неможливість його отримання в наступних спробах, потрібно збереження виділених одиничних сперматозоїдів шляхом кріоконсервації.

І ось тут виникає досить серйозна проблема, яка полягає в тому, що в ході маніпуляцій унікальні одиничні сперматозоїди можуть бути втрачені навіть у дуже невеликих, мікроскопічних обсягах. Вирішити цю проблему можуть мікроконтейнерів. Вони фізично локалізують об'єкт в більшому обсязі, і тим самим значно спрощують і полегшують маніпуляції, пов'язані з обробкою кріоконсервантамі, розморожуванням і пошуком сперматозоїдів при заплідненні шляхом ICSI. Для пацієнта така кріоконсервація може бути страховкою від неотримання сперматозоїдів безпосередньо в день пункції або позбавленням від повторної травматичною операції. Іншими словами, мікроконтейнерів полегшують життя і ембріології, і пацієнту.

У 1996 р. американський дослідник Жак Коен з Інституту репродуктивної медицини і науки Медичного центру св.Варнави в Лівінгстоні (IRMS), запропонував методику кріоконсервації одиничних сперматозоїдів в порожніх оболонках ооцитів людини і лабораторних тварин (рис.1). Ці неклітинні оболонки з гелеподобного речовини носять назву zona pellucida (ед.чісло). Вони оточують кожну яйцеклітину, і ранні зародки розвиваються в цих оболонках до вилуплення з них на стадії бластоцисти, безпосередньо перед імплантацією. Zonae pellucidae (мн.чісло) є дуже добрими мікроконтейнерів, тому що поміщати в них сперматозоїди можна точно так само, як в цитоплазму яйцеклітини при ICSI, а кріоконсервація в таких контейнерах схожа на кріоконсервації ембріонів. І все ж, незважаючи на успішне використання цієї методики в клініці IRMS, вона як і раніше залишається експериментальною і не використовується широко. Цьому перешкоджають багато обставин, два з яких найбільш істотні. По-перше, підготовка такого мікроконтейнерів досить складна, необхідно витягнути з оболонки клітинне вміст, і кожен контейнер готується індивідуально. По-друге, такі мікроконтейнерів тваринного походження можуть бути інфіковані вірусами і не виключають контакту сперматозоїдів з біологічно активними речовинами і чужорідним генетичним матеріалом.

Щоб уникнути цих проблем, ми розробили і виготовили штучні мікроконтейнерів, що нагадують zonae pellucidae (рис .2).

Для їх виготовлення ми використовуємо тільки дві речовини - деіонізованої стерильну воду і агарозу. Агарози схожа за своєю природою і властивостями з речовинами оболонок яйцеклітин, але вона біологічно інертна і безпечна для сперматозоїдів. Виготовлення мікроконтейнерів відбувається в стерильних умовах і виключає можливість зараження. Сам процес заморожування сперматозоїдів в мікроконтейнерів не відрізняється принципово від звичайної кріоконсервації в рідкому азоті, а виживаність сперматозоїдів нітрохи не нижче. Ця нова методика дозволяє нам проводити кріоконсервації в тих випадках, коли доводиться мати справу лише з одиничними сперматозоїдами у всьому об'ємі сперми. Ми сподіваємося, що в майбутньому зможемо ефективно використовувати цей спосіб зберігання унікального генетичного матеріалу в нашій роботі.

Рис.1
Сперматозоїди в порожній zona pellucida.
Фото з сайту http://www.sbivf.com/

Рис.2
Сперматозоїд в штучному
мікроконтейнерів з агарози

Наукова лабораторія клініки МАМА в лютому 2007 року одержала патент на спосіб надійного зберігання одиничних сперматозоїдів. Цей винахід дозволяє набагато поліпшити якість запліднення в найскладніших випадках ЕКЗ.

Для багатьох програм ДРТ, таких як штучна інсемінація і ЕКО, використовується кріоконсервована сперма. Тобто, спочатку сперму збирають, потім заморожують, а в необхідний момент розморожують і використовують для запліднення яйцеклітин.

Але нерідко буває так, що в спермі міститься настільки мало сперматозоїдів, що вони буквально на вагу золота, і втрата навіть декількох з них може привести до негативного результату запліднення. Крім того, стандартні сховища для сперми (так звані Пает) розраховані на досить великий обьем. Зберігання в них одиничних сперматозоїдів виглядає так, як ніби на стадіоні перебуває кілька коників. Начебто, вони є - але знайти надзвичайно складно.

Об'єкт винаходу - мікросфери, в яких зберігаються окремі сперматозоїди - хоч по одному в кожній мікросфері. Це можна порівняти з тим, що коників розсадили в маленькі коробочки - таки легше відшукати.

Створені з біологічної речовини - агарози, - мікроконтейнерів не впливають на стан сперматозоїдів. Тепер при проведенні ЕКО-за важкого чоловічого фактора, тобто, коли сперматозоїди в еякуляті дійсно можна по пальцях перерахувати, КОЖЕН сперматозоїд буде перебувати на обліку. Тому заздалегідь можна буде прогнозувати, яка кількість яйцеклітин буде запліднено при ІКСІ, і більш обгрунтовано говорити про ефективність процедури.

Ваші сперматозоїди будуть зберігатися як в банці!


Стаття отримана: www.ma-ma.ru

Детальніше »